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西花蓟马不同RNA干扰技术比较研究

文献类型: 中文期刊

作者: 李恒 1 ; 周知恩 1 ; 陈勇 1 ; 陆承聪 1 ; 张祥琴 1 ; 王谅 1 ; 陈艺欣 1 ; 田厚军 1 ; 林硕 1 ; 张洁 1 ; 游泳 1 ; 魏辉 1 ;

作者机构: 1.福建农林大学闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室;福建省农业科学院植物保护研究所/福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/农业农村部福州作物有害生物科学观测试验站;云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/云南省农业生物技术重点实验室/农业农村部西南作物基因资源与种质创制重点实验室

关键词: 西花蓟马;RNA干扰;膜饲喂法;显微注射法

期刊名称: 福建农业学报

ISSN: 1008-0384

年卷期: 2019 年 10 期

页码: 1179-1184

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】西花蓟马Frankliniella occidentalis (Pergande)是一种重要的外来入侵害虫,其繁殖能力强、寄主范围广、抗药性强,给我国蔬菜、花卉等经济作物造成了严重危害。本研究旨在评估膜饲喂和显微注射dsActin对西花蓟马Actin基因的沉默效率,以期为蓟马类等小型昆虫基因功能的研究提供方法和依据。【方法】通过膜饲喂和显微注射的方法将体外合成的dsActin导入西花蓟马二龄若虫体内,用RT-qPCR方法检测Actin基因的mRNA表达;通过单头饲养方法观察统计西花蓟马成虫体长、成虫翅膀或胸腹部畸形率及死亡率。【结果】dsActin膜饲喂后24、48、72 h,Actin基因的相对表达量分别为对照组的97%、91%和98%;通过显微注射将dsActin注入西花蓟马体腔,在注射后24、48、72 h,Actin基因的表达量分别为对照组的68%、56%和53%。注射dsActin的西花蓟马在第24~120 h死亡率为44%~98%,显著高于ds GFP对照组;此外,dsActin组个体体长仅为ds GFP对照组的90%,且翅膀或胸腹部出现畸形率为41%。【结论】显微注射dsActin能显著沉默西花蓟马Actin基因mRNA水平的表达,并引起西花蓟马个体不正常发育和死亡,从而建立蓟马类小型昆虫RNAi体系。

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