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用pGAP启动子在P.pastoris中组成型表达cbhⅡ基因

文献类型： 中文期刊

作者： 易国辉 1 ; 屠发志 1 ; 张爱联 1 ; 张添元 1 ; 屈直 1 ; 罗进贤 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院

关键词： 纤维素二糖水解酶;毕赤酵母;基因表达;酶活力

期刊名称： 工业微生物

ISSN： 1001-6678

年卷期： 2010 年 40 卷 04 期

页码： 29-33

收录情况： CSCD

摘要： 用套叠PCR法扩增木霉的cbh Ⅱ基因,以EcoR I和Not I双酶切将其克隆进P.pastoris表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAP-cbh Ⅱ。通过电转法将其cbhⅡ基因重组于P.pastoris基因组,筛选高G418抗性的克隆作为工程菌。用葡萄糖作为碳源摇瓶发酵3 d,分泌的重组蛋白CBHⅡ达到50 mg/L。用CMC酶活法测定发酵液中的CMC酶活力为2.05 U/mL。

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