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大豆脂肪氧化同工酶(Lox1)单克隆抗体的制备

文献类型: 中文期刊

作者: 刘渊 1 ; 张孟臣 2 ; 张彩英 1 ; 马峙英 1 ;

作者机构: 1.河北农业大学农学院分子遗传育种实验室

2.河北省农林科学院粮油作物研究所

关键词: 大豆;脂肪氧化酶;单克隆抗体;ELISA;检测

期刊名称: 植物遗传资源学报

ISSN: 1672-1810

年卷期: 2007 年 8 卷 04 期

页码: 464-468+472

收录情况: CSCD

摘要: 利用薄层等电聚焦电泳检测缺失大豆脂氧酶近等基因系-Su系列,将标记不同缺失类型种子经脱脂、干燥、浸提、离心后制成样品,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和电泳洗脱仪回收获得蛋白。间接ELISA测定Lox1免疫血清效价为1∶1600,免疫BALB/C小鼠的脾细胞和达到对数生长期的SP2/0骨髓瘤细胞融合培养,筛选杂交瘤细胞的阳性克隆,应用有限稀释法和交叉分析,获得3株能稳定传代且分泌Lox1单克隆抗体的、与其他Lox类型没有交叉反应的杂交瘤细胞,各株单抗的效价均在1∶64以上。大豆脂肪氧化同工酶Lox1单克隆抗体用于检测脂氧酶的缺失类型,可为辅助育种提供投资少、见效快的鉴定方法,可为研制大豆脂肪氧化同工酶检测试剂盒提供实验基础。

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