文献类型： 中文期刊

作者： 宋玄 ¹ ; 王泽华 ² ; 单双 ³ ; 张永军 ³ ; 王山宁 ² ;

作者机构： 1.中国农业大学农学与生物技术学院

2.北京市农林科学院植物保护环境保护研究所

3.植物病虫害生物学国家重点实验室

关键词： 白蜡窄吉丁;气味结合蛋白;触角感器;免疫组织化学;配体结合特性;嗅觉感受

期刊名称： 昆虫学报

ISSN： 0454-6296

年卷期： 2021 年 001 期

页码： 10-18

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】本研究旨在解析白蜡窄吉丁Agrilus planipennis气味结合蛋白AplaOBP3在触角中的定位及配体结合特性,同时比较AplaOBP3与已报道的AplaOBP1和AplaOBP2的功能异同。【方法】原核表达白蜡窄吉丁气味结合蛋白AplaOBP3,制备多克隆抗体并进行Western blot检测;采用免疫组织化学技术在白蜡窄吉丁触角感器中对AplaOBP3的表达进行定位;通过荧光竞争结合实验分析AplaOBP3重组蛋白与58种化合物的结合特性,并与前期报道的白蜡窄吉丁AplaOBP1和AplaOBP2蛋白的配体结合特性进行比较。【结果】原核表达系统中成功表达AplaOBP3重组蛋白;免疫定位结果显示AplaOBP3在白蜡窄吉丁触角的锥形感器类型I中表达。荧光竞争结合实验结果表明,重组AplaOBP3蛋白与反-2-己烯醛、苯甲醛、4′-乙基苯乙酮、β-紫罗兰酮和罗勒烯具有强的结合能力,其解离常数K_D值分别为6.20,4.03,5.24,1.72和4.83μmol/L。AplaOBP3与AplaOBP2具有相似的表达及配体结合特性。【结论】白蜡窄吉丁气味结合蛋白AplaOBP3与AplaOBP2具有相似的表达及配体结合特性,它们可能共同参与白蜡窄吉丁的嗅觉感受,在白蜡窄吉丁寄主定位过程中发挥作用。