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双抗虫基因对三倍体毛白杨的转化和抗虫性表达

文献类型： 中文期刊

作者： 杨敏生 1 ; 李志兰 2 ; 王颖 3 ; 王进茂 1 ; 梁海永 1 ;

作者机构： 1.河北农业大学

2.中国林业科学研究院亚热带林业研究所

3.中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室

关键词： 三倍体毛白杨;双抗虫基因;遗传转化;抗虫性

期刊名称： 林业科学

ISSN： 1001-7488

年卷期： 2006 年 42 卷 09 期

页码： 64-71

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立三倍体毛白杨叶片再生体系,用部分改造BtCry1Ac基因与慈菇蛋白酶抑制剂(API)基因构建的双抗虫基因表达载体,通过农杆菌介导法转化三倍体毛白杨无性系,在含卡那霉素50 mg·L-1的分化培养基上诱导产生不定芽的叶片占18 %,在生根培养基上对转基因植株做进一步筛选,获得50个转化再生株系。PCR检测表明:80 %的植株呈现阳性反应,部分株系进行Southern Blot检测,证明外源基因已经插入杨树基因组中。用Bt毒蛋白抗血清进行ELSA检测,结果表明:7个转基因株系都有Bt杀虫蛋白表达,表达量最高的株系约占叶总可溶性蛋白的0·016 1 %。用经分子生物学检测的28个转基因株系叶片进行舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫饲虫试验,结果表明:不同株系幼虫杀死率明显不同,有39·3 %的株系对舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫的致死率在80 %以上;25·0 %的株系对两种害虫的幼虫死亡率均在60 %~80 %之间;另有35·7 %的株系幼虫死亡率在50 %以下,有些株系基本未表现出抗虫性。同时具高抗虫性的转基因株系能够明显抑制存活幼虫的生长和发育。

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