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常规和巢式PCR对柑橘黄龙病菌的检测灵敏度比较

文献类型: 中文期刊

作者: 鹿连明 1 ; 胡秀荣 1 ; 张利平 1 ; 黄振东 1 ; 陈国庆 1 ;

作者机构: 1.浙江省柑橘研究所

关键词: 柑橘黄龙病;常规PCR;巢式PCR;灵敏度

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2010 年 31 卷 08 期

页码: 1280-1287

收录情况: CSCD

摘要: 根据柑橘黄龙病(citrus Huanglongbing,HLB)病菌16SrDNA、16S/23S核糖体基因间隔区(ribosomal intergenic region,RIR)、核糖体蛋白β操纵子(β-operon)和外膜蛋白(out membrane protein,OMP)基因序列设计了8对引物,通过常规和巢式PCR方法对各引物的检测灵敏度进行了比较。结果表明,不同引物的检测灵敏度不同。对于上述任何基因,巢式PCR的灵敏度均比常规PCR至少高103倍;对于同一种基因,扩增短片段的引物比扩增长片段的引物灵敏度高或相当;在扩增产物大小相同时,用以扩增核糖体蛋白β操纵子基因的引物较其他三种稍高。对不同症状柑橘样品的检测进一步验证了该结果。因此,对于柑橘黄龙病的检测,可优先考虑使用巢式PCR方法,若使用常规PCR,则宜选用具有高灵敏度的扩增小片段引物。

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