文献类型： 中文期刊
作者： 姚婧 1 ; 唐燕琼 1 ; 黄明忠 2 ; 丁亚操 1 ; 杨光穗 2 ;
作者机构： 1.海南大学农学院
2.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
关键词： 火焰兰;SRAP-PCR;体系优化
期刊名称： 广东农业科学
ISSN： 1004-874X
年卷期： 2014 年 41 卷 20 期
页码： 141-144
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为建立火焰兰SRAP-PCR体系,采用U20(55)均匀试验设计,以10份火焰兰种质基因组DNA为模板,用3对SRAP引物对DNA模板、Mg2+、引物、Taq DNA聚合酶和d NTPs等5个因素的浓度进行优化组合和验证。结果表明,提取的火焰兰基因组DNA纯度高、完整性好;利用引物对Me6/Em6进行PCR扩增,对20个处理初步筛选出扩增条带较清晰,多态性丰富的处理,再用2个DNA模板进行复筛,获得最佳反应体系(20μL):模板DNA 60 ng、Mg2+2.0 mmol/L、引物1.0μmol/L、Taq DNA聚合酶1.2 U、d NTPs 0.20 mmol/L。最后用2对引物、8份火焰兰种质来验证优化SRAP-PCR体系,其所获条带清晰,多态性丰富。
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