文献类型： 中文期刊

作者： 徐翔飞 ¹ ; 黄盼 ² ; 崔雪梅 ² ; 黄叶娥 ² ; 季权安 ² ; 韦强 ² ; 李科 ² ; 宋厚辉 ¹ ; 鲍国连 ¹ ; 刘燕 ² ;

作者机构： 1.浙江农林大学动物科技学院动物医学院

2.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 猪;巴氏杆菌;波氏杆菌;双重PCR

期刊名称： 浙江农业科学

ISSN： 0528-9017

年卷期： 2023 年 010 期

页码： 2533-2539

摘要： 本文旨在建立一种针对猪巴氏杆菌和波氏杆菌的特异、高效的双重PCR检测方法并应用于临床样品检测。根据巴氏杆菌和波氏杆菌保守序列16S rRNA基因为靶基因，应用Primer 3.0 Plus软件设计了2对引物，在此基础上建立并优化双重PCR反应体系。结果显示，该双重PCR检测方法能有效扩增出猪巴氏杆菌和波氏杆菌的172和519 bp的特异性片段，PCR扩增产物测序结果为目标片段；对副猪嗜血杆菌、产气荚膜梭菌、大肠埃希菌、沙门氏菌、链球菌的扩增结果均为阴性。将该方法应用于临床样品检测，对63例呼吸道症状的病猪的鼻拭子和肺脏进行细菌分离，其中10份样品检测出巴氏杆菌，8份样品检测出波氏杆菌，2份为巴氏杆菌和波氏杆菌混合感染，与已报道的PCR检测方法符合率为100%。表明该研究建立的双重PCR体系可为临床猪巴氏杆菌、波氏杆菌及混合感染提供一种灵敏且高效的检测方法。