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香蕉条斑病毒LAMP快速检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 彭军 1 ; 郭立佳 1 ; 王国芬 1 ; 杨腊英 1 ; 汪军 1 ; 黄俊生 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所

关键词： 香蕉条斑病毒;环介导等温核酸扩增技术;检测

期刊名称： 植物病理学报

ISSN： 0412-0914

年卷期： 2012 年 42 卷 06 期

页码： 577-584

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术。本研究以香蕉条斑病毒(Banana streak virus,BSV)ORF3保守区域为基础针对6个特定区域设计并筛选了4条LAMP扩增引物,通过对LAMP反应中MgSO4、dNTPs、Betaine等主要试剂浓度进行优化,建立了香蕉BSV的LAMP检测方法,63℃反应90 min后通过在反应产物中添加SYBR GreenⅠ染料后颜色的变化,肉眼即可判断检测结果。LAMP具有极高的检测特异性和灵敏性,其检测下限约为3.2 ng·μL-1,是PCR检测灵敏度的25倍,能快速、准确地对疑似样品进行检测,本研究对华南地区部分疑似样品的检测结果显示LAMP阳性检出率比PCR检出率高。本文建立的BSV LAMP检测方法是对BSV检测方法的拓展和延伸,为香蕉病毒的快速检测提供技术保障。

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