文献类型： 中文期刊

作者： 仝利剑 ¹ ; 赵建增 ¹ ; 张社民 ² ; 高荣 ¹ ; 高英杰 ¹ ; 慕泽鑫 ¹ ; 邢海云 ¹ ; 罗胜军 ³ ; 温涛 ¹ ;

作者机构： 1.吉林大学

2.山西省芮城县家畜家禽疫病防治站

3.广东省农业科学院兽医研究所

关键词： PRRSV;N蛋白;双抗原夹心ELISA

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2010 年 30 卷 10 期

页码： 1273-1276

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据PRRSV VR-2332株序列设计了1对扩增PRRSV N蛋白基因的特异性引物,从PRRSV北方株感染细胞中提取总RNA,通过RT-PCR获得长约372 bp的N蛋白编码基因片段。将其克隆到pGEX-6p-1质粒,构建了原核表达载体pPRRS-N。重组基因在大肠杆菌中表达出相对分子质量约为41 000的融合蛋白,目的蛋白表达量约占菌体蛋白的28.5%。利用此重组融合N蛋白建立了一种检测PRRSV特异性抗体的双抗原夹心ELISA,并通过与商品化试剂盒的应用比较对本方法进行了系统评价。分析了来自北京、山东、河南、河北4省区13个养猪场的260份血清,结果表明,本方法的敏感性和特异性分别为93.5%和86.7%,与IDEXX PRRSV抗体检测试剂盒检测结果的符合率达到91.5%。