文献类型： 中文期刊

作者： 罗文彬 ¹ ; 李华伟 ² ; 汤浩 ² ; 邱思鑫 ² ; 纪荣昌 ² ; 许泳清 ² ; 刘中华 ² ; 邱永祥 ² ;

作者机构： 1.福建省农业科学院作物研究所

2.福建省农业科学院作物研究所,农业部闽台农作物种质资源利用重点开放实验室

关键词： 马铃薯;病毒;检测方法;多重RT-PCR

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2015 年 42 卷 02 期

页码： 280-288

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用多重RT-PCR方法,建立可同时检测马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯M病毒(PVM)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯A病毒(PVA)和马铃薯S病毒(PVS)的方法。根据Gen Bank中PVX、PVM、PVY、PVA及PVS(CP)基因序列设计特异引物,对多重RT-PCR退火温度、循环次数、延伸温度、引物组合浓度进行优化,建立了能同时检测5种马铃薯病毒的多重RT-PCR方法。该方法能同时扩增出PVX、PVM、PVY、PVA及PVS特异片段,其大小分别是138、213、369、468和657 bp。测序结果表明,5种病毒的序列与相应参考序列相似性达到97%以上。灵敏度分析结果表明,多重RT-PCR方法能够检测植物组织量为10-3 mg。应用建立的多重RT-PCR检测方法对田间样品和组培苗进行检测,结果显示,该方法可以准确、快速、灵敏地同时检测单一或复合侵染的5种马铃薯病毒。