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根癌农杆菌介导的大麦幼胚遗传转化影响因素研究

文献类型： 中文期刊

作者： 李静雯 1 ; 张正英 1 ;

作者机构： 1.甘肃省农业科学院生物技术研究所

关键词： 大麦;幼胚;根癌农杆菌;遗传转化

期刊名称： 大麦与谷类科学

ISSN： 1673-6486

年卷期： 2010 年 02 期

页码： 1-6

摘要： 为建立和优化根癌农杆菌介导的大麦遗传转化体系,以大麦幼胚为转化受体,研究了根癌农杆菌介导法转化大麦的主要影响因素。结果表明,以gus基因瞬时表达率、抗性愈伤组织诱导率为转化指标,筛选出了对大麦幼胚感染力比较强的农杆菌菌株EHA105,以及高敏感受体基因型甘啤4号和秀81-47等。实验结果还表明,预培养1 d的大麦幼胚具有较高的瞬时表达率(91%),是较好的转化受体。菌液侵染浓度OD600=0.5,侵染时间为30 min时转化效率最高。在此基础上,侵染后幼胚与农杆菌采用液体共培养方式可明显提高转化效率,gus基因瞬时表达率最高可达90%。在优化条件下,转化约30 d后抗选择剂潮霉素(Hyg)的愈伤组织占受体组织总数的34.2%。

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