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利用甘薯质体同源片段构建多顺反子表达载体

文献类型: 中文期刊

作者: 王玉华 1 ; 黄丛林 2 ; 贾敬芬 1 ;

作者机构: 1.西北大学生命科学学院

2.北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心

关键词: 甘薯;质体同源片段;多顺反子;表达载体

期刊名称: 基因组学与应用生物学

ISSN: 1674-568X

年卷期: 2009 年 28 卷 04 期

页码: 41-49

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究利用质体基因组的进化保守性,根据烟草质体基因组全序列设计引物,从甘薯(Ipomoea batatas L.)质体基因组中克隆了两个相邻的功能基因rbcL(GenBank登录号为AY942199)和accD(GenBank登录号为AY942200),以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。选用水稻质体基因组强启动子prrn及psbA3'非翻译区调控选择标记基因aadA和报告基因gfp,构建多顺反子表达盒prrn-aadA-gfp-psbA-3',之后将表达盒克隆进甘薯质体同源片段中,获得甘薯质体多顺反子定点整合表达载体pSAG,酶切鉴定结果表明所构建的载体符合预期设计。这为后期甘薯质体转化体系的建立和通过质体基因工程手段将更多目的基因导入甘薯进行遗传改良奠定了基础。

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