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不同赤眼蜂品系ISSR-PCR条件优化及分子鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 裴毅夫 1 ; 李正西 1 ; 王素琴 2 ; 康总江 2 ;

作者机构： 1.中国农业大学农学与生物技术学院

2.北京市农林科学院植物保护环境保护研究所

关键词： 赤眼蜂;ISSR-PCR;品系鉴定和筛选

期刊名称： 昆虫知识

ISSN： 0452-8255

年卷期： 2009 年 46 卷 03 期

页码： 388-393

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 赤眼蜂Trichogramma不同品系在寄生能力等生物学特性上存在差异,而这些差异可能被用于优良品系的筛选。通过优化影响赤眼蜂不同品系ISSR-PCR的主要参数,建立适于鉴别赤眼蜂不同品系的ISSR-PCR反应体系和扩增程序。在20μL反应体系中,各反应物的最适含量为10×PCR Buffer 2.0μL,MgCl22.0μL(25mmol/L),dNTPs1.6μL(2.5mmol/Leach),正反向引物各1μL(25μmol/L),DNA模板1.0μL,Taq酶0.4μL(2.5U/μL),和ddH2O。ISSR-PCR的扩增程序为:95℃预变性5min,94℃变性50s,52℃退火1min,72℃延伸1min20s,35个循环,72℃延伸10min。结果表明,在上述优化条件下,采用ISSR-PCR可实现对7个赤眼蜂优良品系的分子鉴定。该研究对于赤眼蜂优良品系的筛选具有潜在的应用价值。

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