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不同提取方法在橡胶树总RNA提取中的应用研究

文献类型： 中文期刊

作者： 孙芳 1 ; 安泽伟 2 ; 王其同 1 ; 李玉婷 1 ; 华玉伟 2 ; 黄华孙 2 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院橡胶研究所／国家橡胶树育种中心／农业部橡胶树生物学重点开放实验室

关键词： 橡胶树;RNA提取;CTAB-NaAc法

期刊名称： 热带农业科学

ISSN： 1009-2196

年卷期： 2012 年 32 卷 03 期

页码： 31-36

摘要： 总RNA的纯度和完整性对橡胶树分子生物学实验至关重要。为探索更适合橡胶树总RNA的提取方法,本文以巴西橡胶树无性系热研7-33-97叶片为试材,利用凝胶电泳、紫外吸光值测定、RT-PCR检测等方法对CTAB-LiCl法和CTAB-NaAc法提取的总RNA进行比较。结果显示:CTAB-LiCl法提取RNA不仅耗时产率低,且RNA溶液中的Li+和Cl-影响反转录效率。CTAB-NaAc法提取叶片的总RNA经DNaseⅠ处理后凝胶电泳条带完整,产率高,无DNA污染;A260/A280比值为2.03,A260/A230比值为1.96;反转录的cDNA经PCR检测质量较好。另用CTAB-NaAc法对橡胶树的花、树皮、胚、根进行总RNA的提取,均能得到较高质量的总RNA。

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