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橡胶树胶乳C-乳清双向电泳样品制备技术的建立及优化

文献类型: 中文期刊

作者: 戚继艳 1 ; 蓝基贤 2 ; 秦云霞 2 ; 龙翔宇 2 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学重点开放实验室

2.中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学重点开放实验室;海南大学农学院

关键词: 橡胶树C-乳清;双向电泳;TCA/丙酮沉淀法;双乙法;超声助溶

期刊名称: 亚热带植物科学

ISSN: 1009-7791

年卷期: 2012 年 03 期

页码: 16-20

摘要: 在TCA/丙酮沉淀法的基础上,用乙醇和乙醚洗涤(称双乙法)沉淀获得橡胶树胶乳C-乳清蛋白样品,并在样品溶解时通过超声助溶进一步提高样品的溶解度。结果显示,利用改良后的样品制备方法(TCA/丙酮+双乙法+超声处理)所获得的C-乳清蛋白样品的溶解性大幅增加,蛋白得率高达8.47 mg/mL C-乳清,为传统TCA/丙酮法的1.6倍;同时降低了盐离子浓度,等电聚焦时升压顺利、聚焦完全,双向电泳的图谱质量明显改善,在银染2D胶上可获得1 206个蛋白点,为传统TCA/丙酮法的2.7倍。本文对胶乳C-乳清蛋白样品制备方法进行深入优化,获得了重现性较好的高质量双向电泳蛋白图谱,促进了橡胶树蛋白质组学研究。

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