文献类型： 中文期刊
作者： 孟超敏 1 ; 张晓东 2 ; 陈天佑 3 ;
作者机构： 1.河南科技大学农学院
2.北京农业生物技术研究中心
3.西北农林科技大学农学院
关键词： 转基因小麦;DNA提取;PCR;反应体系优化
期刊名称： 西北农林科技大学学报(自然科学版)
ISSN： 1000-2782
年卷期： 2005 年 33 卷 10 期
页码： 24-28
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 采用改进的CTAB法,研究了与PCR相匹配的转基因小麦单株微量DNA的快速提取方法。结果表明,该提取方法简便、快速、有效,提取的DNA产量和质量完全可以用于PCR扩增。对标准PCR的反应体系进行优化,建立了最佳的转外源高赖氨酸基因小麦植株的PCR扩增体系,即10×R eaction Bu ffer 2.5μL,M gC l225 mm o l/L,dNTP s 2.5 mm o l/L,模板DNA 30~60 ng,引物1.2μm o l/L,T aq酶1 U,加ddH2O至25μL,优化的PCR反应体系显著提高了转基因小麦植株筛选和鉴定的效率。
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