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芒果DNA提取方法比较及ISSR反应体系的优化

文献类型: 中文期刊

作者: 王家保 1 ; 王令霞 2 ; 刘志媛 2 ; 杜中军 1 ; 易小平 1 ; 徐碧玉 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

2.华南热带农业大学园艺学院

关键词: 芒果;DNA提取;ISSR;反应体系

期刊名称: 生物技术

ISSN: 1004-311X

年卷期: 2005 年 15 卷 05 期

页码: 37-41

收录情况: CSCD

摘要: 为从芒果幼叶中提取高质量的核总DNA,比较了5种DNA提取方法提取芒果叶片核DNA的效果,结果表明:改良CTAB法1提取的DNA A260/A280值最好,ISSR-PCR扩增效果最佳,是有效提取芒果基因组DNA的方法。为得到最佳的芒果ISSR-PCR反应体系,以(ATG)6为引物,采用单因素实验法,优化了ISSR-PCR反应体系:在总体积25μl的反应体系中,含1×反应缓冲液,0.20mmol.L-1dNTPs,0.20μmol.L-1引物,0.60 UTaqDNA聚合酶,30-50 ng DNA模板,不足体积用无菌超纯水补足。

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