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籼稻明恢86多基因遗传转化体系的研究

文献类型: 中文期刊

作者: 魏林艳 1 ; 连玲 1 ; 魏毅东 1 ; 罗曦 1 ; 何炜 1 ; 谢鸿光 1 ; 谢华安 1 ; 张建福 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院水稻研究所

关键词: 基因;遗传转化;籼稻;明恢86

期刊名称: 福建农业学报

ISSN: 1008-0384

年卷期: 2019 年 006 期

页码: 621-629

收录情况: CSCD

摘要: [目的]探索适合籼稻明恢86多基因遗传转化的条件,为创制含高产、抗逆、抗虫、抗病等基因的水稻新材料奠定基础.[方法]以籼稻明恢86为受体材料,将构建好的含作物高产基因RRM2、耐旱基因HS1、抗除草剂基因EPSPS、抗虫基因Bt、细胞凋亡抑制基因iap和促细胞再生基因p35等多基因载体(载体分别命名为P5和P8)进行遗传转化.在此基础上,分别对多基因遗传转化体系的受体材料、农杆菌浓度、侵染时间、共培养方式、G418筛选浓度和草甘膦筛选浓度等主要影响因素进行试验,探讨其适宜的转化条件.[结果]受体材料的筛选结果表明,幼胚的出愈率显著高于成熟胚,且其愈伤组织状态相对较好;各转化条件的筛选结果,农杆菌侵染浓度OD600为0.4~0.6、侵染时间15~20 min、共培养2~3 d、培养基上添加无菌滤纸、G418筛选浓度150 mg·L-1和草甘膦筛选浓度800 mg·L-1是提高转化效率的优化条件; PCR分析结果,多基因载体P5中的GUS基因成功转入籼稻明恢86.[结论]通过对培养条件的优化,可使籼稻明恢86愈伤组织的诱导愈伤率和抗性愈伤率得到显著提高.

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