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人工合成的GFM cry11B基因在大肠杆菌中表达、纯化及抗体制备

文献类型： 中文期刊

作者： 丁敏 1 ; 王锋 1 ; 苏军 1 ; 陈志厚 1 ; 陈在杰 1 ; 孙明 2 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院农业遗传工程重点实验室

2.华中农业大学农业微生物农业部重点实验室

关键词： GFM cry11B基因;原核表达;融合蛋白;多克隆抗体

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2004 年 12 卷 06 期

页码： 98-103

收录情况： CSCD

摘要： 用限制性内切酶酶切的方法把人工合成的GFM cry11B基因编码区克隆到原核表达载体pGEX-4T-3中,构建成重组表达质粒pGC。在大肠杆菌(Escherichia coil)中表达了GST-GFMCry11B融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的21％,其表达产物主要以包涵体的形式存在。对包涵体蛋白进行可溶性处理,用Glutathione Sephrose 4B纯化出GST-Cry11B融合蛋白。Thrombin酶切后得到Cry11B蛋白,将其作为抗原免疫家兔获得了滴度(ELISA)为1:8000的抗血清,并具有较强的特异性。

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