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安祖花ISSR-PCR反应体系的优化和确立

文献类型： 中文期刊

作者： 杨京燕 1 ; 葛亚英 2 ; 田丹青 2 ;

作者机构： 1.台州科技职业学院

2.浙江省农业科学院花卉研究开发中心

关键词： 安祖花;ISSR;单因素试验;体系优化

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2014 年 42 卷 06 期

页码： 38-40

收录情况： 北大核心

摘要： 为建立适宜安祖花DNA的ISSR-PCR扩增体系,采用单因子试验对影响ISSR-PCR反应的各组分(Taq DNA聚合酶、模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+浓度)进行了优化,确立了适合安祖花的条带清晰、多态性高、重复性好的最佳ISSR-PCR反应体系,即在20μL PCR反应体系中含有10×PCR Buffer 2.0μL、25 mmol/L MgCl21.2μL、10 mmol/L dNTPs 0.8μL、5 U/μL Taq酶0.2μL、10μmol/L引物3.0μL、20 ng/μL模板2.0μL;并利用2条引物对15个安祖花品种进行了稳定性鉴定,为安祖花的遗传多样性分析及育种工作提供技术支持。

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