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亚麻SRAP-PCR反应体系的优化建立及多态性标记筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 郝荣楷 1 ; 张建平 2 ; 党占海 2 ; 赵利 2 ; 李闻娟 2 ;

作者机构： 1.甘肃农业大学农学院

2.甘肃省农科院作物研究所

关键词： 亚麻;SRAP标记;正交试验;体系优化;引物筛选

期刊名称： 甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2013 年 48 卷 05 期

页码： 43-49

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以亚麻叶片DNA为模板,以Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物和Taq DNA聚合酶进行4因素3水平正交试验设计,对亚麻SRAP反应体系进行优化,并比较了不同浓度模板DNA对扩增效果的影响,建立了亚麻的SRAP最佳反应体系.结果表明:亚麻SRAP-PCR最佳反应体系为2.5μL 10×Loading buffer、Mg2+浓度3.0mmol/L、dNTPs浓度0.25mmol/L、引物浓度0.2μmol/L、Taq DNA聚合酶1.0U、模板DNA 75ng,总体积为25μL.各因素对扩增反应结果均有不同影响,其中以Mg2+浓度影响最大,Taq DNA聚合酶的影响最小.运用该体系对15份不同来源亚麻品种进行验证,证明该体系稳定可靠,并从169个SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的引物组合21个.

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