文献类型： 中文期刊
作者： 王婷 1 ; 何炜 2 ; 何文锦 1 ; 叶冰莹 1 ; 陈由强 1 ;
作者机构： 1.福建师范大学生命科学学院
2.福建省农业科学院水稻研究所
关键词： 表达载体构建;果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶(F2KP);定点突变
期刊名称： 亚热带农业研究
ISSN： 1673-0925
年卷期： 2013 年 9 卷 03 期
页码： 207-211
摘要： 果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶(fructose-6-phosphate,2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase,F2KP)是影响生物碳积累和分配的调控关键酶,同时也是一个具有激酶和酯酶两种催化活性的双功能酶。为筛选出高酯酶酶活性的改造酶分子,本研究通过定点突变与片段缺失方法改造蔗叶F2KP基因,将蔗叶F2KP基因的Asp442、His508和Arg446分别突变为Gly、Ala和Pro,并且将分别缺失F2KP基因的酯酶的大部分和激酶的大部分构建F2KP激酶重组片段和酯酶重组片段,将突变后的基因与表达载体pPIC9K双酶切后进行连接,构建重组质粒。经过菌落PCR和双酶切重组质粒均证明已将目的片段转到酵母表达载体pPIC9K内。
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