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草莓NCED基因正反义表达载体和RNAi载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 朱海生 1 ; 陈敏氡 1 ; 李严曼 1 ; 温庆放 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院作物研究所

关键词： 草莓;NCED;表达载体;RNA干扰

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2012 年 33 卷 03 期

页码： 459-466

收录情况： CSCD

摘要： 根据草莓(Fragaria ananassa Duch)NCED基因序列(GenBank:HQ399498),克隆NCED基因开放阅读框,将该片段插入植物表达载体pBI 121的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,构建了正义表达载体pBI 121NCED。克隆NCED基因正义、反义片段和作为内含子的gusA基因片段,以植物表达载体pBI 121为基础,以pCAMBIA2301作为中间载体,通过多次酶切和连接,成功构建了草莓NCED基因RNAi表达载体pBI121NCEDRNAi和反义表达载体pBI 121NCEDF。经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定后,成功将pBI121NCED、pBI 121NCEDF和pBI 121NCEDRNA 3个重组表达质粒导入农杆菌EHA105中。研究结果为进一步研究草莓NCED基因的功能奠定了基础。

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