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蜻蜓凤梨AfAP2-1基因的克隆与表达载体构建

文献类型： 中文期刊

作者： 张静 1 ; 张学全 2 ; 李志英 3 ; 雷明 4 ; 徐立 3 ;

作者机构： 1.华中农业大学植物科技学院

2.农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室

3.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所

4.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与种质创新重点实验室

关键词： 蜻蜓凤梨;Af AP2-1;过表达

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2015 年 13 卷 06 期

页码： 1276-1282

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过对蜻蜓凤梨转录组数据的分析,我们获得一个跟拟南芥AP2同源片段,基于此设计引物,利用RACE技术首次从蜻蜓凤梨中克隆到完整的Af AP2-1序列,其c DNA全长2 185 bp,开放阅读框全长1 404 bp,编码467个氨基酸。保守结构域分析其含有两个AP2结构域,属于AP2亚家族。系统进化树分析发现该蛋白与拟南芥的AP2 RAP2.7亲缘关系较近。通过在CDS序列两端分别引入XbaⅠ和KpnⅠ限制性内切酶酶切位点,我们成功构建了Ca MV35S-Af AP2-1-GUS过表达载体。利用农杆菌介导法转化拟南芥植株后,再通过GUS染色和RNA水平鉴定发现Ca MV35S-Af AP2-1-GUS已转入拟南芥中并且能正常表达。本研究可为Af AP2-1的功能鉴定奠定基础,对深入研究凤梨科植物开花调控的分子机理具有重要意义。

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