文献类型： 中文期刊

作者： 周晓红 ¹ ; 陈晓光 ¹ ; 张晓东 ² ; 王亚楠 ³ ; 李林 ³ ; 习佳飞 ³ ; 胡建军 ³ ;

作者机构： 1.第一军医大学寄生虫学教研室

2.北京市农林科学院生物技术研究中心

3.第一军医大学学员一旅五队

关键词： 番茄;果实特异性E8启动子;基因克隆

期刊名称： 第一军医大学学报

ISSN： 1000-2588

年卷期： 2003 年 01 期

页码： 25-28

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的获取番茄果实特异性E8启动子基因,为实现外源基因在转基因番茄中果实特异性表达做准备。方法培养中蔬5号(Zhongshu No.5)番茄幼苗, 采集叶片,用Omega公司的植物基因组提取试剂盒提取番茄基因组DNA;设计引物,从基因组中通过PCR扩增获得番茄果实特异性E81.1和E82.2启动子基因;克隆进pGEM-T载体,酶切鉴定;送上海基康公司测序;序列分析。结果从番茄基因组DNA中PCR扩增得到预期大小的启动子片段;构建重组pGEM-T-E81.1和pGEM-T-E82.2载体,经酶切证实具有与目标片段长度相符的插入片段;测序结果分析显示:番茄果实特异性E8启动子序列高度保守,所获得的Zhongshu No.5 E82.2启动子DNA序列与Deikman报道的Cherry种的E82.2启动子同源性为99%, 登陆GenBank, ID号为AF515784。结论成功获得Zhongshu No.5番茄果实特异性E81.1、E82.2启动子基因,为下一步转基因番茄口服疫苗的研制奠定了一定的工作基础。