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正交优化设计蒙药阿给ISSR-PCR反应体系

文献类型: 中文期刊

作者: 王真 1 ; 刘越 1 ; 孙辉 2 ; 游光霞 3 ; 孙洪波 1 ; 申刚义 4 ; 黄雪涛 1 ; 毛珂 1 ; 段福宇 1 ; 谢龙生 1 ; 蒋武霖 1 ; 冯金朝 1 ; 黄璐琦 5 ;

作者机构: 1.中央民族大学生命与环境科学学院

2.北京市农林科学院北京杂交小麦工程技术研究中心

3.中国农业科学院作物科学研究所

4.中央民族大学中国少数民族传统医学研究院

5.中国中医科学院中药研究所

关键词: 阿给;正交设计;ISSR-PCR;反应体系

期刊名称: 安徽农业科学

ISSN: 0517-6611

年卷期: 2010 年 38 卷 15 期

页码: 61-63

收录情况: 北大核心

摘要: [目的]建立适用于蒙药阿给(Artemisia frigidaWilld.)的ISSR反应体系,为ISSR标记技术在蒙药阿给遗传多样性研究中的应用奠定技术基础。[方法]利用正交试验设计,从Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶和引物浓度4因素3水平,对蒙药阿给ISSR-PCR反应体系进行优化分析,并在此基础上对PCR的循环次数及退火温度进行试验。[结果]在20μl反应体系中,Mg2+为1.5mmol/L,dNTP为0.25mmol/L,TaqDNA聚合酶为1.5U,引物为0.75μmol/L时,且ISSR最适的循环次数为40,最适退火温度为56.0℃,扩增效果最好。[结论]筛选出的反应体系适用于蒙药阿给的ISSR扩增。

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