文献类型： 中文期刊
作者： 关志辉 1 ; 陈新 2 ; 王海燕 2 ; 刘陈 2 ; 马平安 3 ;
作者机构： 1.海南大学农学院
2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所
3.海南大学农学院中国热带农业科学院热带生物技术研究所
关键词： 木薯;可溶性淀粉合成酶Ⅱ;启动子;核心启动子区;缺失分析
期刊名称： 基因组学与应用生物学
ISSN： 1674-568X
年卷期： 2015 年 34 卷 08 期
页码： 1753-1760
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 木薯淀粉被广泛用作各种食品、饲料及工业淀粉制品的原材料。然而目前,国内外还未见木薯可溶性淀粉合成酶基因Me SSs的启动子相关研究报道。本研究通过在木薯基因组数据库中查询Me SSⅡb基因第一个外显子及其上游序列,通过PCR扩增获得Me SSⅡb上游序列。对获得的上游序列通过Plant CARE及PLACE进行启动子结构及元件分析,并与其它物种中SSSs基因启动子区序列利用BLAST进行比对分析后,确立翻译起始位点上游1 566 bp序列为启动子区,进而设计并构建了包括完整启动子在内的5'端梯度缺失启动子融合GUS蛋白植物表达载体p E1566::GUS、p E1356::GUS、p E1116::GUS、p E531::GUS、p E453::GUS、p E387::GUS、p E138::GUS转化本氏烟草进行启动子活性验证。利用叶盘侵染法转化本氏烟草进行启动子梯度缺失分析后发现,缺失启动子p E1356、p E1116、p E531活性丧失,缺失至翻译起始位点上游138 bp的缺失启动子p E138,仍具有启动子活性。上述表明,在克隆启动子区1 566 bp片段中,在-1 566 bp和-1 356 bp之间210 bp序列片段对于完整启动子活性尤为重要,而-1 356 bp至-531 bp之间存在启动抑制因子,在-453 bp和-138 bp为基础启动序列,初步推断为转录起始结合位点。
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