文献类型： 中文期刊

作者： 黄小镂 ¹ ; 雷亚欣 ¹ ; 黄建峰 ² ; 罗海燕 ² ; 乔飞 ² ; 丛汉卿 ² ; 陈业渊 ² ;

作者机构： 1.海南大学园艺学院

2.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业农村部华南作物基因资源与种质创制重点实验室

关键词： ’红象牙’杧果;脂氢过氧化物裂解酶;生物信息学分析;原核表达

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2022 年 20 卷 016 期

页码： 5274-5281

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 挥发性醛类是水果挥发物质之一,脂氢过氧化物裂解酶(hydroperoxide lyase,HPL)是植物体内的脂肪酸代谢途径中醛类挥发物质合成下游的关键酶.为探索杧果中挥发性醛的种类及其合成途径进而挖掘相关基因,本研究以'红象牙'杧果果肉作为实验材料,通过气相色谱质谱联用技术(GC-MS)分析了果实中醛类挥发物,利用同源克隆技术从果实中克隆HPL基因,在原核表达系统中诱导并纯化该酶蛋白,添加前体物质进行酶促反应.结果表明,'红象牙'果肉中醛的种类和含量较少;从果肉中克隆出一个HPL基因,命名为MiHPL,长1 485 bp,编码494个氨基酸,理化性质分析发现MiHPL属于亲水性蛋白、不稳定蛋白,无跨膜结构,蛋白质分子质量约为54.85 kD;对转录组数据的PFKM值分析显示果实后熟过程表达量下调.生物信息学、系统进化树及原核表达结果表明杧果MiHPL基因可能是属于CYP74B亚族;酶活性鉴定实验表明,该酶具有催化底物13(S)-过氧羟基-(9Z,11E,15Z)-十八碳三烯酸(13-HPOD)、13(S)-氢过氧基-(9Z,1 1E,15Z)-十八三烯酸(13-HPOT)中第13位的过氧基断裂产生己醛、反-2-己烯醛的活性,属于13-HPL.实验结果为今后进行杧果挥发醛的研究提供参考.