文献类型： 中文期刊
作者： 曾作财 1 ; 许承扬 1 ; 张晓东 1 ; 王金洛 1 ; 杨兵 1 ; 李国平 2 ;
作者机构： 1.北京市农林科学院
2.福建农林大学动物科学学院
关键词： 猪传染性胃肠炎病毒;纤突糖蛋白;转基因玉米;表达
期刊名称： 分子植物育种
ISSN： 1672-416X
年卷期： 2012 年 10 卷 05 期
页码： 43-48
收录情况： CSCD
摘要： 本研究拟构建携带猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白基因(TGEV-S)的转基因玉米植株并检测其表达情况。首先利用PCR方法自携带TGEV-S基因的重组质粒中扩增2.2kb的S基因片段,然后插入植物表达载体pBAC176中,该表达载体以编码除草剂草甘膦抗性的EPSP基因作为选择标记,目的基因以双增强子的CaMV35S(E35S)及其玉米Hsp70第一内含子为驱动。以授粉后10～12d约0.5～1mm大小的玉米幼胚为受体,用基因枪进行转化,经过愈伤组织诱导、草甘膦抗性筛选和分化再生培养,先后获得74株转化再生植株。利用PCR和Southern blot检测表明,T0代转基因苗有9株检测结果为阳性。T1代转基因玉米株系经PCR检测有14个转基因株系为阳性,初步确定了目的基因在这些转基因玉米中的稳定整合。进而通过间接ELISA分析初步确定目的基因在7个T1代转基因玉米株系获得了表达。研究结果为进一步研究表达TGEV-S转基因玉米的生物学活性奠定了基础。
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