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大肠杆菌glgC基因的定点突变及高效表达

文献类型: 中文期刊

作者: 姚庆荣 1 ; 郭运玲 2 ; 孔华 2 ; 张金文 2 ; 郭安平 2 ; 贺立卡 2 ; 刘恩平 2 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室

2.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,中国热带农业科学院热带生物技术研究所海口571101,中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,中国热带农业科学院热带生物技术研究所海口571101,中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,中国热带农业科学院热带生物技术研究所海口571101,甘肃农业大学农学院,中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,中国热带农业科学院热带生物技术研究所海口571101,中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,中国热带农业科学院热带生物技术研究所海口571101,中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,中国热带农业科学院热带生物技术研究所海口571101 海口571101,海口571101,海口571101,兰州730070,海口571101,海口571101,海口571101

关键词: glgC基因;定点突变;原核表达

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2007 年 28 卷 01 期

页码: 64-68

收录情况: CSCD

摘要: 通过PCR方法,从E.coliJM109基因组DNA中扩增到全长为1296bp的glgC基因,对其进行定点突变,获得第296位和336位氨基酸同时突变的glgC336基因。将2者亚克隆进pET-30a,成功构建了重组表达载体pET-C和pET-C336,转化大肠杆菌BL21(DE3),在1mmol/LIPTG诱导下进行表达。SDS-PAGE电泳分析显示,在约53kD处有1条明显的蛋白表达带,证明目的基因已得到高效表达,且重组蛋白表达量占菌体蛋白总量的77.3%。

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