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茎-环RT-qPCR法定量检测羊背最长肌3种miRNA的表达

文献类型: 中文期刊

作者: 王霄鹏 1 ; 宋雪梅 2 ; 姜俊芳 2 ; 吴建良 2 ; 石放雄 1 ; 周水良 3 ; 李慧 4 ; 蒋永清 1 ;

作者机构: 1.南京农业大学动物科技学院

2.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

3.杭州庞大农业义桥羊业基地

4.湖州太湖湖羊养殖专业合作社

关键词: 湖羊;肌肉;miRNA;茎-环RT-qPCR

期刊名称: 畜牧与兽医

ISSN: 0529-5130

年卷期: 2015 年 47 卷 12 期

页码: 31-35

收录情况: 北大核心

摘要: 本研究建立了一种可避免基因组污染的茎—环RT-q PCR miRNA定量检测方法。利用该方法可准确、快速、低成本地检测湖羊和杜泊羊×湖羊杂交羊肌肉中miR-1、miR-133和oar-miR-299-5p的表达。以6月龄雄性湖羊和杜泊羊×湖羊杂交羊F1代各4只的背最长肌样品为研究对象,利用特异性茎环反转录引物以及miRNA上下游引物对3种miRNA进行基于SYBR GreenⅠ的荧光定量PCR检测,并以5S rRNA为内参基因,2-ΔΔCt法检测miRNA的相对表达量。结果显示:6月龄雄性湖羊背最长肌中oar-miR-299-5p表达量极显著高于6月龄雄性杜泊羊×湖羊杂交羊(P<0.01),提示oar-miR-299-5p可能与湖羊早期背最长肌的生长发育相关。

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