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丝瓜18S rRNA基因克隆及其作为内参基因的应用

文献类型: 中文期刊

作者: 朱海生 1 ; 陈敏氡 1 ; 温庆放 1 ; 蓝新隆 1 ; 李永平 1 ; 王彬 1 ; 张前荣 1 ; 吴卫东 2 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院作物研究所

2.福建省种植业技术推广总站

关键词: 丝瓜;18S rRNA;内参基因;实时荧光定量PCR

期刊名称: 核农学报

ISSN: 1000-8551

年卷期: 2016 年 30 卷 01 期

页码: 35-41

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 选择合适的内参基因是提高实时荧光定量PCR分析(q RT-PCR)准确性的重要条件。18S r RNA基因表达范围广、表达量恒定,常作为内参基因应用于实时荧光定量PCR中。为了获得丝瓜18S r RNA基因,并设计合适的荧光定量PCR内参引物,解决丝瓜实时荧光定量PCR检测中无内参基因的现状,通过PCR和序列测定,首次克隆到了丝瓜的18S r RNA基因序列,其长度为1 862 bp,Gen Bank登录号为KM656452。在此基础上设计1对荧光定量PCR引物,该引物特异性强,扩增效率高,在丝瓜各生长发育阶段及各种非生物胁迫条件下均能稳定表达,适合在丝瓜基因表达研究中作为内参基因。该研究结果可为开展丝瓜重要功能基因的表达模式和调控机制的研究奠定基础。

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