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金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶基因的克隆及高效表达

文献类型： 中文期刊

作者： 任文彬 1 ; 张世清 1 ; 黄俊生 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所热带作物生物技术国家重点实验室

关键词： 金龟子绿僵菌;几丁质酶基因;大肠杆菌

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2006 年 26 卷 07 期

页码： 31-36

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 几丁质酶是昆虫病原真菌金龟子绿僵菌致病力的主要因子之一。用RT-PCR方法,从分离筛选到的高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae伽HN1中,扩增得到几丁质酶基因全长,此基因全长为1275bp,登录号为DQ011865,经Blastn分析此基因序列与M.anisopliae E6的chi1基因(AFD2749)同源率为96％。以pET-22b(+)为基础载体,构建pET-chi重组表达载体,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL 21中进行表达。经SDS-PAGE分析,获得了42kDa大小的重组目的蛋白,目的蛋白占表达总蛋白含量的63．3％。菌体经冷冻与超声波破碎后,按DNS法可测得几丁质酶的活性。

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[1]金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶基因的克隆及高效表达. 任文彬,张世清,黄俊生. 2006

[2]金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶与谷胱甘肽S-转移酶GST在大肠杆菌中的高效融合表达. 任文彬,张世清,黄俊生. 2009

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