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象耳豆根结线虫Me-mapk1基因的克隆及RNAi分析

文献类型: 中文期刊

作者: 魏丽莎子 1 ; 龙海波 2 ; 陈绵才 3 ; 赵志祥 3 ;

作者机构: 1.海南大学环境与植物保护学院

2.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所

3.海南省农业科学院植物保护研究所

关键词: 象耳豆根结线虫;促分裂原活化蛋白激酶;基因克隆;原核表达;RNA干扰

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2016 年 37 卷 10 期

页码: 1980-1985

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是线虫体内信号转导的重要组分,在生长发育过程中具有重要作用。本研究从象耳豆根结线虫中克隆了1个促分裂原活化蛋白激酶基因Me-mapk1c DNA序列,该序列全长1 369 bp,包含1个1 185 bp的完整开放阅读框,推导编码394个氨基酸,蛋白质分子量为45.39 ku。同源性搜索比对结果发现,该基因编码的蛋白序列与南方根结线虫MI-MAPK1具有99%的一致性。通过构建原核表达载体p ET-32a-MAPK,在IPTG的诱导下得到70 ku左右的特异融合蛋白(包括大小约26 ku的标签序列)。利用RNAi技术对象耳豆根结线虫二龄幼虫Me-mapk1基因进行沉默,线虫诱导番茄根结形成的数量显著减少,推测Me-mapk1基因的下调表达有可能影响象耳豆根结线虫二龄幼虫(J2)的生长发育。

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