文献类型： 中文期刊
作者： 赵秀英 1 ; 张晓东 1 ; 张霆 1 ; 黄德庄 1 ; 阎惠平 1 ; 罗朝霞 1 ; 杨凤平 1 ;
作者机构： 1.北京市肝炎研究所,北京农业生物技术研究中心 ,首都儿科研究所 ,北京市肝炎研究所,北京市肝炎研究所,北京市肝炎研究所,北京农业生物技术研究中心 北京100054 ,北京100054 ,北京100054 ,北京100054
关键词： 乙肝病毒表面抗原;基因枪;胡萝卜;除草剂抗性
期刊名称： 微生物学免疫学进展
ISSN： 1005-5673
年卷期： 2002 年 01 期
页码： 1-4
摘要： 构建HBV表面抗原 (HBsAg)植物表达载体并在胡萝卜植株中表达。采用自行构建adr亚型HBsAg基因克隆T adr,再次酶切获得 860bp含PreS2的HBsAg基因片段 ,将其插入到植物表达载体pBPC5 5 ,新质粒命名为pBPC91adr。将其与含除草剂抗性基因及GUS蛋白基因的筛选质粒 pBPC93共同经基因枪 (PDS 10 0 0 /He)转化胡萝卜悬浮细胞 ,经含除草剂 (Biolaphos)的培养基筛选及植物激素诱导分化 ,获得除草剂抗性胡萝卜幼苗。结果为转化后 8周 ,自胡萝卜细胞中分化出除草剂抗性胡萝卜幼苗。提取新分化幼苗总DNA ,特异性引物PCR扩增后可见860bp扩增带 ;Southern Blot证明有HBsAg基因整合 ,胡萝卜蛋白萃取物的Western Blot及ELISA检测证实有HBsAg蛋白表达。利用基因枪转化使质粒 pBPC91adr中HBsAg基因在胡萝卜幼苗内整合并表达 ,提示以植物生产疫苗具有可行性
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