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SEC2在莱茵衣藻中的表达及免疫学活性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 李建成 1 ; 彭世清 2 ; 胡章立 3 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室

3.深圳大学生命科学学院深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室

关键词： 基因工程;金黄色葡萄球菌;肠毒素C2;莱茵衣藻;超抗原;转基因藻;抗肿瘤;定点突变

期刊名称： 深圳大学学报(理工版)

ISSN： 1000-2618

年卷期： 2012 年 02 期

页码： 159-164

收录情况： EI ; 北大核心

摘要： 通过将金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)肠毒素C2(staphylococcal entero-toxin C2,SEC2)基因进行定点突变,获得具有超抗原性的减毒C2基因序列sec2t,把该基因插入含Hsp 70A-RBCS2启动子和RBCS2终止子的pH124载体上,构建莱茵衣藻表达载体pH124sec2t,采用"珠磨法"将该载体转入细胞壁缺陷型莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)CC-849中,经含10μg/mL Zeomy-cin的抗性平板筛选、PCR及RT-PCR分析,获得转基因莱茵衣藻Tran-sec2t.Southern blot和Western blot分析表明,sec2t基因已整合入莱茵衣藻核基因组中,且能表达相对分子质量为26 kDa(1 Da=1 u)的目的蛋白.分别以CC-849和Tran-sec2t两种藻细胞培养液(每毫升106个细胞)喂食Balb/c小鼠,并用流式细胞仪检测分析小鼠CD3+、CD4+和CD8+细胞,结果发现,可表达减毒超抗原SEC2T的转基因莱茵衣藻Tran-sec2t能刺激小鼠T淋巴细胞的产生;与对照相比,CD4+与CD8+细胞数目比值有所降低,但CD3+和CD8+细胞有明显提高.研究结果有助于利用转基因藻生产抗肿瘤制剂和动物免疫增强剂.

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