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巴西橡胶树红根病菌DNA提取有效方法比较

文献类型： 中文期刊

作者： 涂敏 1 ; 蔡海滨 1 ; 孙爱花 1 ; 胡彦师 1 ; 华玉伟 1 ; 黄华孙 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室/国家橡胶树育种中心

关键词： 巴西橡胶树;红根病菌;DNA提取;CTAB改良法

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2012 年 28 卷 34 期

页码： 12-16

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在筛选适用于橡胶树红根病菌DNA提取的有效方法并评价其效果。利用CTAB改良法、氯化苄改良法、SDS改良法等3种方法提取橡胶树红根病菌菌丝体DNA,并通过紫外吸收光谱和琼脂糖凝胶电泳对DNA样品进行检测,比较提取DNA的产量、质量;再选用提取效果最好的方法提取5个时间段(4、6、8、10、12天)的菌丝DNA并进行ITS-PCR检测。CTAB改良法提取的样品DNA纯度最好,产率最高,OD260/OD280为1.82～1.84,浓度可达280μg/mL;培养4～6天的菌丝提取的DNA质量最高,适合PCR检测需要。CTAB改良法是一种适用于橡胶树红根病菌DNA提取的理想方法。

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