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建兰花叶病毒RT-LAMP检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 樊荣辉 1 ; 黄敏玲 1 ; 钟淮钦 1 ; 罗远华 1 ; 叶秀仙 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院作物研究所;福建省农业科学院花卉研究中心;福建省特色花卉工程技术研究中心

关键词： 建兰花叶病毒;RT-LAMP;检测

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2019 年 03 期

页码： 541-545

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CyMV)是侵染兰花的主要病毒,严重影响其观赏价值,建立快速、灵敏的检测方法显得尤为重要。根据CyMV的外壳蛋白基因序列设计4对特异性引物,经过优化反应条件,建立该病毒的RT-LAMP检测方法,并进行LAMP检测的特异性、敏感性检测。该方法能特异扩增CyMV,与其他4种病毒(齿兰环斑病毒、菜豆黄花叶病毒、黄瓜花叶病毒和小苍兰花叶病毒)不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍。田间检测20份样品中,RT-LAMP和RT-PCR检测结果一致,检出率为60%。在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ,直接用肉眼观察就可判断样品是否感染CyMV,可省去电泳分析的时间。针对CyMV建立的RT-LAMP方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点,适用于在进境检疫及种苗繁育过程中的检测鉴定。

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