文献类型: 中文期刊
作者: 张智 1 ; 王永勤 1 ; 侯雷平 2 ; 关绚丽 1 ; 李梅兰 2 ; 梁毅 1 ;
作者机构: 1.北京市农林科学院蔬菜研究中心
2.山西农业大学研究生学院
关键词: 胡萝卜;线粒体;mtDNA;提取方法;PCR
期刊名称: 分子植物育种
ISSN: 1672-416X
年卷期: 2010 年 8 卷 01 期
页码: 191-195
收录情况: CSCD
摘要: 本研究以胡萝卜根为材料,通过高盐差速离心和蔗糖沉淀差速离心两种方法提取线粒体DNA。通过改变缓冲液、使用DNaseⅠ处理得到了无核DNA污染的线粒体。用SDS和蛋白酶K裂解线粒体,经酚:氯仿:异戊醇抽提除去蛋白,并用RNaseA消化从而得到单纯线粒体DNA。本实验还特别设计了叶绿体特异性引物检测线粒体DNA纯度。结果表明:利用优化后的蔗糖沉淀差速离心法提取胡萝卜线粒体DNA,所得线粒体DNA纯度高、产量高,每克肉质根能够得到27.60μg线粒体DNA。
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