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Metarhizium anisopliae var.anisopliae Pr1A基因的克隆表达及抗血清研究

文献类型： 中文期刊

作者： 宋妍 1 ; 张世清 1 ; 黄俊生 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所热带作物生物技术国家重点实验室

关键词： Metarhizium anisopliae var.anisopliae;PrlA基因;克隆;表达;抗血清

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2006 年 16 卷 05 期

页码： 3-7

收录情况： CSCD

摘要： 采用RT-PCR方法从本实验室分离筛选到的金龟子绿僵小孢变种Metarhizium anisopliae vat．anisopliae中,扩增得到PrlA基因全长,此基因全长为1242bp,经Blastn分析此基因序列与M．anopliae的PrlA基因(M73795)同源率为98%。以pET- 22b(+)为基础载体,构建pET-PrlA重组表达载体,在大肠杆菌(Escherichia．coli)BL 21(DE3)中进行表达。经SDS—PAGE分析,获得了约42kDa大小的重组目的蛋白,目的蛋白占表达总蛋白含量的63．2%。将表达的PrlA蛋白切胶回收后制备成抗原,免疫家兔4次后,采血收集抗血清,用ELISA测定效价为1/10000。结果表明,获得的抗体可用于更进一步的研究,将有利于我们进一步了解M．anisopliaeis的侵染机理,弄清楚各Pr蛋白酶的作用方式和对寄主的选择优势,提高生防控制的有效性。

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