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香蕉红素氧还蛋白基因在酵母双杂交系统中的自激活检测

文献类型： 中文期刊

作者： 程萍 1 ; 冯仁军 1 ; 袁克华 1 ; 张丽丽 1 ; 祁君凤 1 ; 张银东 1 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

关键词： 香蕉红素氧还蛋白;CdRD基因;FRD基因;酵母双杂交;自激活作用

期刊名称： 生物学杂志

ISSN： 1008-9632

年卷期： 2010 年 27 卷 02 期

页码： 47-50

收录情况： CSCD

摘要： 利用PCR方法扩增香蕉红素氧还蛋白基因的保守结构域序列CdRD和开放性阅读框序列FRD,并在其上下游分别引入NdeⅠ和SalⅠ酶切位点,双酶切后与同样经NdeⅠ和SalⅠ双酶切的诱饵质粒载体pGBKT7连接,构建重组诱饵质粒pGBKT7-CdRD和pGBKT7-FRD,并将此两重组诱饵质粒转入酵母菌株AH109中进行营养缺陷型分析检测毒性及自激活。结果表明,成功构建了重组诱饵质粒pGBKT7-CdRD和pGBKT7-FRD,并且其无自激活报告基因作用,对酵母菌株也无毒性作用。这说明此两个重组诱饵质粒可用于酵母双杂交系统,为从香蕉叶片cDNA文库中筛选获得与香蕉红素氧还蛋白基因的保守结构域序列CdRD和开放性阅读框序列FRD相互作用的受体蛋白基因奠定了基础。

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