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甘蔗14-3-3基因真核表达载体构建及分析

文献类型: 中文期刊

作者: 罗炼芳 1 ; 苏俊波 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院南亚热带作物研究所

关键词: 甘蔗;14-3-3基因;表达载体

期刊名称: 安徽农学通报

ISSN: 1007-7731

年卷期: 2013 年 21 期

页码: 17-19

摘要: 该实验拟构建甘蔗14-3-3基因的真核表达载体,为体外研究该蛋白功能和高级构象特征奠定基础。用RT-PCR技术从甘蔗茎中扩增出编码14-3-3蛋白的全长基因,并连入pGEM-T载体中,双酶切和测序用于序列正确性的鉴定。结果表明,该基因的最大开放阅读框为771bp,编码256个氨基酸。后将所得cDNA片段亚克隆至真核表达载体pPIC9K,经电转后在酵母细胞中表达,表达产物经Western blot鉴定分子量约为28kD。表明已成功构建了甘蔗14-3-3蛋白真核表达载体,并获得了表达产物。

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