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橡胶树HbHMGR1基因克隆及其愈伤组织转化

文献类型: 中文期刊

作者: 马晓晓 1 ; 李哲 2 ; 戴雪梅 2 ; 毕政鸿 1 ; 方家林 2 ; 黄华孙 2 ; 李运合 3 ; 贺永国 4 ;

作者机构: 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学重点开放实验室

3.中国热带农业科学院南亚热带作物研究所

4.海南大学园艺园林学院

关键词: 橡胶树;HbHMGR1基因;易碎愈伤组织;根癌农杆菌;遗传转化

期刊名称: 南方农业学报

ISSN: 2095-1191

年卷期: 2014 年 45 卷 05 期

页码: 818-823

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】克隆橡胶树HbHMGR1基因,转化橡胶树易碎愈伤组织,为橡胶树遗传转化和品种改良打下基础。【方法】根据已经报道的HbHMGR1基因序列(NCBI登录号X54659.1)设计特异引物,通过RT-PCR克隆HbHMGR1基因,构建pCAMBIA2301-35S-HbHMGR1植物表达载体。再用EHA105(携带pCAMBIA2301-35S-HbHMGR1,内含NPTII和uidA基因)侵染橡胶树易碎愈伤组织,数月筛选后对抗性易碎愈伤组织系进行GUS染色和分子检测。【结果】成功克隆了HbHMGR1基因,双酶切重组质粒、重组质粒的PCR扩增结果证明成功地构建了该基因的植物表达载体pCAMBIA2301-35S-HbHMGR1。侵染后抗性橡胶树易碎胚性愈伤组织GUS检测为蓝色,且分子检测呈现阳性,共获得15个抗性易碎愈伤组织系。【结论】橡胶树HbHMGR1基因在愈伤组织阶段开始表达,有效提高了HbHMGR1基因在橡胶中的表达量。

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