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巴西橡胶树胶乳磷脂酶A_2的分离纯化及部分酶学性质鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 邓治 1 ; 刘实忠 1 ; 校现周 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学重点开放实验室

关键词： 巴西橡胶树;磷脂酶A2;酶的纯化;酶的性质

期刊名称： 广西植物

ISSN： 1000-3142

年卷期： 2010 年 30 卷 06 期

页码： 178-182

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过丙酮沉淀、DEAE-纤维素离子交换柱层析和Sephadex G-100凝胶过滤柱层析等分离纯化技术,对巴西橡胶树胶乳C-乳清磷脂酶A2进行分离纯化。用SDS-PAGE测定其亚基的相对分子量。测定该酶最适温度和pH,动力学常数Km和Vmax。并测定Ca2+和La3+对酶活性的影响。结果显示:该酶被纯化了49.47倍,产率为5.12%。SDS-PAGE检测为单一条带,其亚基相对分子量约43kDa。最适反应温度为37℃,最适反应pH为8.0,Km为0.44mmol·L-1,Vmax为7.22μmol.(mL.min)-1。最适Ca2+浓度为50μmol·L-1,稀土元素La3+离子对磷脂酶A2活性有抑制作用,但加入Ca2+后可缓解La3+对磷脂酶A2活性的抑制作用。胶乳C-乳清磷脂酶A2与其他植物磷脂酶A2在Ca2+的依赖性上存在差异。研究结果为今后探索橡胶树胶乳磷脂酶A2的催化机理、调节机理及生理功能等奠定了基础。

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