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硫氧还蛋白抗体柱的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 畅文军 1 ; 王宇光 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： 硫氧还蛋白;融合表达;硫氧还蛋白抗体柱;纯化

期刊名称： 生物技术通讯

ISSN： 1009-0002

年卷期： 2011 年 22 卷 01 期

页码： 81-84

摘要： 目的:探索硫氧还蛋白(Trx)抗体柱对Trx融合蛋白纯化的可行性。方法与结果:对含有Trx基因的质粒表达载体pTrxFus进行改造,在Trx读框之后加入6×His序列,并在大肠杆菌中表达C端带有6×His标签的Trx,经Ni2+柱亲和纯化后制备多克隆抗体;把经蛋白A纯化后的抗体偶联在溴化氰活化的琼脂糖凝胶上,制成Trx抗体柱;用此抗体柱纯化与Trx融合表达的豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI),SDS-PAGE结果显示获得了纯度较高的Trx-CpTI。结论:用Trx抗体制成的免疫亲和层析柱可以有效纯化Trx融合蛋白。

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