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水稻幼穗分化特异性启动子pRFL的克隆和特征分析

文献类型: 中文期刊

作者: 苏军 1 ; 林智敏 2 ; 刘霞 2 ; 胡太蛟 2 ; 李刚 2 ; 颜静宛 2 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院生物技术研究所

2.福建省农业科学院生物技术研究所,福建省农业遗传工程重点实验室

关键词: 水稻;幼穗分化;特异性启动子;克隆;特征分析

期刊名称: 应用与环境生物学报

ISSN: 1006-687X

年卷期: 2016 年 04 期

页码: 675-679

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 组织特异性启动子能够驱动基因在特定的时期和部位表达,克服组成型启动子启动的外源基因在受体植物中非特异、持续、高效表达所造成的浪费,是基因工程技术最重要元件之一.本研究利用PCR技术从水稻基因组中克隆了幼穗分化特异表达基因RFL翻译起始位点上游2 001 bp的启动子序列,命名为pRFL.生物信息分析显示,该片段含有36个转录起始核心启动子元件TATA-box和多个启动子增强子区顺式作用元件CAAT-box,以及多个光反应调控元件和植物激素响应元件等.将其与GUS基因构建成植物表达载体,导入水稻"日本晴",组织化学染色法检测显示,转基因水稻植株叶片、茎均无GUS显色,花序及发育中的小花有较强表达;荧光定量PCR测定幼穗GUS基因转录活性,显示pRFL驱动的GUS基因表达量比actin启动子驱动的GUS基因表达量高2.9倍.上述结果初步证明了pRFL为幼穗分化特异性启动子.

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