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拟南芥中与植物生长和耐寒相关的miRNA表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 蔡杰 1 ; 杨成龙 2 ; 段瑞军 2 ; 郭建春 2 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院生物技术研究所

关键词： miRNA;表达载体;重叠延伸PCR技术;双酶切

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2010 年 29 卷 04 期

页码： 202-206

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究通过PCR方法从拟南芥基因组序列中分离了3个理论推断与耐寒相关的miRNA片段(miRNA402,miRNA319和miRNA393)和1个与植物生长相关的片段miRNA172。利用重叠延伸PCR技术将miRNA172小分子,以及3个与耐寒相关的miRNA402,miRNA319和miRNA393小分子串连在一起分别导入植物表达载体pVKH-35S-GUS-pA,取代表达载体中的GUS基因,构建了pVKH-35S-mir172-pA和pVKH-35S-mir31+402+393-pA融合表达载体。经PCR和双酶切及测序鉴定,pVKH-35S-mir172-pA和pVKH-35S-mir319+402+393-pA构建成功,为后续利用基因工程手段,miRNA转化木薯,提高木薯生长和木薯耐寒相关研究奠定基础。

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