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激发子蛋白SbES高密度重组表达和粉剂研发

文献类型： 中文期刊

作者： 杨扬 1 ; 陈奕鹏 1 ; 王茂存 2 ; 章淑艳 2 ; 刘先宝 1 ; 黄贵修 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室/海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室/海南省热带作物病虫害生物防治工程技术研究中心

2.河北省微生物研究所有限公司

关键词： 激发子蛋白;异源表达;高密度发酵;粉剂制备;植物蛋白农药

期刊名称： 热带农业科学

ISSN： 1009-2196

年卷期： 2025 年 45 卷 002 期

页码： 64-71

摘要： 激发子蛋白SbES是帚枝霉属内生真菌HND5产生的一个外泌丝氨酸蛋白酶，可有效诱导多种植物产生抗病性，具有可商品化开发为植物蛋白农药的潜力。为建立该蛋白的高密度发酵及粉剂制备工艺，利用已构建好的SbES蛋白毕赤酵母异源表达菌株Pichia pastoris X-33(pRICZA::SbES)，对该蛋白的高密度发酵条件、菌体破碎条件及适宜喷雾干燥条件进行优化。结果表明，在测试范围内，SbES蛋白毕赤酵母异源表达菌株在pH 6.5、温度28℃和菌体浓度180 g/L条件下诱导108 h，可获得最大表达量；目标异源表达菌株15%菌体浓度，在300 W功率下超声40 min，可获得最大的SbES蛋白量；SbES蛋白最适的助干剂为麦芽糊精，在5%麦芽糊精，干燥塔出风口温度为140℃的条件下干燥，SbES蛋白可保存最大的酶活性。本研究结果为激发子蛋白SbES的商品化开发提供了研究基础。

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[2]利用毕赤酵母系统直接分泌表达具有活性的谷氨酰胺转胺酶. 李鹏飞,孙红兵,游丽金,巩伏雨,陈藻,张爱联,朱泰承. 2013

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[4]工程菌P.pastoris GS115(pPIC9K-lac2)的构建及诱导表达漆酶的研究. 沈锦城,张泽华,杨穗珊,张添元,罗进贤,张爱联. 2013

[5]苏云金芽胞杆菌S-层蛋白基因的异源表达及分离纯化. 杨晓琳,郭刚,张凤娟,孙士锋,朱朝华,曾会才. 2013

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