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剑麻DNA高效提取及RAPD反应体系优化

文献类型： 中文期刊

作者： 王尉 1 ; 周文钊 2 ;

作者机构： 1.安徽农业大学生命科学院

2.中国热带农业科学院南亚热带作物研究所

关键词： 剑麻;DNA提取;RAPD;体系优化

期刊名称： 中国麻业科学

ISSN： 1673-7636

年卷期： 2008 年 30 卷 04 期

页码： 188-192

摘要： 针对剑麻组织中多糖、多酚和次生物质含量高的特点,对其基因组DNA提取方法进行研究。比较了SDS法、CTAB法提取基因组DNA的效果,结果分析表明:CTAB法提取效果较佳,A260/A280为1.8左右,A260/A230大于2.0,电泳检测基因组DNA纯度和完整性较好。后基于基因组DNA水平,对RAPD反应体系中镁离子浓度、dNTP浓度和退火温度三个重要的影响因子进行优化,得出在25μl反应液中,Mg2+浓度为2.0mmol·L-1,酶为1.0U,引物为0.1"mol·L-1,dNTP为0.2mmol·L-1,37℃退火温度扩增40个循环效果较佳。

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